共聚焦拉曼影像显微镜快速共聚焦显微拉曼光谱成像的意义:
共聚焦拉曼显微镜已经广泛应用于物理,化学,半导体,生物等各种研究领域。显微拉曼光谱法可以对微区的样品实现非接触,无破坏性,无需样品制备的分析测试,可以方便的判别此微区样品的物理和化学性质。随着应用的发展,微区拉曼光谱成像的需求快速增长。微区拉曼光谱成像的好处是既可以得到光谱信息,同时又得到了空间二维甚至三维信息。
由于拉曼信号通常很微弱,当用户希望做拉曼光谱影像时,往往由于时间问题很难付诸实际,我们来做一个计算,对于某一个样品,采集空间一点的拉曼光谱时间为1秒的话,如果希望实现对空间128x128点每点均采集拉曼光谱的话,需要时间为:
128*128=16,384秒=4.55小时
这对于实验者几乎是无法接受的,
德国Witec公司出品的Alpha300-R快速共焦拉曼显微镜在优化显微镜和光谱采集系统的同时,还创新性的采用了EMCCD和平台扫描同步采谱功能,可以在保证高信噪比的同时把单个空间点的采谱时间降到50ms以下甚至ms级别。这样做同样的一个拉曼光谱成像实验,我们需要的时间是:
0.05*128*128=819.20秒=13.65分钟
系统参数:
激光器:442nm, 488nm,514nm,532nm,633nm,785nm 等可选,功率10-150mW(根据不同激光器)
光谱仪:300mm焦距,f/4;通光量 70%;600g/mm和1800g/mm光栅
EMCCD: 1600x200背感光深度制冷电子倍增型光谱CCD
基于Zeiss显微镜的共焦拉曼显微镜,空间分辨率可达200nm (采用532nm激光和油浸物镜)
PZT扫描台,扫描范围200x200x2-um;扫描准确度4x4x0.5nm; 线性度好于0.02%
最大可装载样品直径150mm;
标准测试模式:拉曼光谱,光谱vs时间,拉曼光谱影像XY, YZ; 3D成像
可实现原位原子力显微镜与共焦拉曼显微镜联用
共聚焦拉曼影像显微镜