制备凝胶悬浮液
Sephadex LH-20在使用之前必须进行溶胀。在溶胀的过程中,要尽量避免过分搅拌,否则会破坏球形胶粒,且要避免使用磁力搅拌器。
1. 在室温下,将凝胶溶胀于层析溶剂中至少三小时,溶胀后胶体积的大小决定于所使用的溶剂系统,请参考后页之干胶溶胀表计算特定柱体积所需要干胶的量。
2. 使溶胀胶体积沉淀之后占总体积的75%,上层溶剂占25%,这时,悬浮液从一个容器倒入另一容器时胶粒可移动。
3. 将溶胀后的凝胶根据装柱要求均匀倒入柱内,在保证胶粒不变形的前提下,应在尽可能高的压力下装柱,反压不要超过1.5ba。
平衡
上样前,用洗脱液平衡层析柱至少两个柱体积直到基线变得平稳为止,如改变溶剂应该注意凝胶在新溶剂中的溶胀性质,并根据性质确定柱高调节器的位置,如使用相同的溶剂,在以后的层析中柱平衡可以省略。
洗脱液
为确保延长层析柱的使用寿命,所有的缓冲液都应该离心或经过0.45um的膜过滤以除去杂质。
样品
样品体积应该占柱总体积的1-2%,同样在使用之前样品应该离心或经过0.45um的膜过滤。
洗脱
洗脱流速应根据情况而定,zui大张性流速约12cm/min(反压1.5ba),建议流速为1-10cm/h。总体来说,较低的流速,具有较高的分辩率。
货号 |
产品 |
包装 |
颗粒度大小(um) |
性能/应用 |
PH稳定性工作(清洗) |
耐压(pa) |
zui高流速(ch/m) |
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17-0090-10 |
Sephadex LH-20 |
25 g |
100-4000 |
干粉 |
胆固醇、脂肪酸、激素、维他命、 |
2-13 |
720 |
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17-0090-01 |
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100 g |
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18-111 |
天然产物 |
[2-13] |
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17-0090-02 |
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500 g |
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17-0090-03 |
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5 kg |
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