细胞常见问题分析
1、冷冻管应如何解冻?
取出冷冻管后,须立即放放37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可以超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另外冻管由液氨桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。
2、可否使用与原先培养条件不同之培养基?
不能。每一细胞株均有其特定使用自己适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同的之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活。
3、可否使用与原先培养条件不同之血清种类?
不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产品极大的影响。来自不同特种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
4、悬浮性细胞应如何继代处理?
一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,可将培养角瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。
5、欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?
欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg(约1,000rpm),5-10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡。
6、如果细胞发生微生污染时,应如何处理?
加入相应抗生素。直接灭菌后丢弃。
7、各种细胞培养用的dish,flash是否均相同?
不同厂牌的dish或flash,其所coating的polymer不同,制造程序亦不同,虽对大部分细胞没有太大之影响,惟少数则可能因使用厂牌不同之dish或flask而有显著之生长差异。