色谱法的分离原理是溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationaryphase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出的分离过程,其实质是一个吸附与解吸附的平衡过程。
色谱柱与流动相的温度,影响着组分的分离平衡,对于使用柱温箱的有益之处我们认为有以下几点:
1.可以使保留时间相对恒定,对需要进行的定性鉴别可提高其可信
度;
2.保留时间相对恒定是进行定量的基础,不同的保留时间不仅不能
判断其成份的一致性,同时,由于保留时间不同峰面积也必将发
生变化,其检测结果的可信度将受质疑。
3.温差较大时,因保留时间不稳将增加检测工作的麻烦。
4.温度低的时候,因流动相黏度增加而使检测时间延长,同时增加
泵的磨损,影响设备的使用寿命。
5.温度低的时候还因溶解度相对下降而出现缓冲盐结晶而堵塞泵、
进样阀、管道、色谱柱的现象。
6.温度低时还因溶解度下降使杂质吸附在填料上而难于洗脱,从而
影响色谱柱的使用寿命。
.对于流动相温度的控制目前没有很好的方法,即使是整个室内使用空调也难于使流动相的温度保持一致,因此,目前大多采用控制柱温的方法,使用柱温箱能耗低,控温精度高,是液相色谱仪必备的辅助设备,药品标准中,有不少品种对柱温也有明确要求。
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