PerfinityiDP采用优化的专用胰蛋白酶固定化色谱柱,与以往的手工操作酶切处理相比,可大幅缩短消解时间。从酶切、脱盐到酶解肽段的HPLC分析的过程实现在线化,可以完全自动处理,不但缩短了前处理时间,还实现了高可靠性的前处理以及分析。另外,专用软件支持一系列过程的方法制作,因此,分析者无需进行复杂设置便可使用本系统。本系统是适于蛋白制剂、抗体药的肽绘图、生物标记的有效性验证等广泛用途的蛋白质分析新平台。
本系统由各HPLC单元与PerfinityiDP启动组件以及FCV-36AH超高压2位10通流路切换阀构成。Perfinity启动组件包括专用控制软件与为构成系统所需的配管部件。
*iDP为integratedDigestionPlatform的简称。
*PerfinityiDP为PerfinityBiosciences,Inc在美国的注册商标。
PerfinityiDP系统具有以下特长:
1)最快1分钟完成蛋白质的在线胰蛋白酶消解
PerfinityiDP采用高效率的胰蛋白酶固定化色谱柱,对样品中的蛋白质进行在线酶切。通过使用已最优化的专用胰蛋白酶消解缓冲液,提高了消解效率,实现了最快1分钟完成的在线酶切。本色谱柱可以重复使用,因此可以进行连续的多样品自动分析。PerfinityiDP可以同时进行从胰蛋白酶消解到基于脱盐色谱柱的浓缩过程与从自脱盐色谱柱洗脱到基于HPLC进行分析的过程,提高了分析通量。为此,可以实现日分析蛋白质样品200个以上。
2)专用软件支持制作从酶切到分析的方法
在从胰蛋白酶消解、脱盐直到HPLC分析的一系列过程中,专用的PerfinityiDP软件支持方法选择和制作。只需输入酶切时间、分析色谱柱尺寸、梯度时间等最小限度的项目便可自动最优化分析所需的各种参数,因此分析者无需进行复杂的参数设置操作。使用本软件还可以简便地制作用于自动分析的分析计划。分析后,从本软件访问LabSolutions软件,可方便地进行分析结果的阅览与解析。
3)在线自动化保证卓越的分析可靠性
PerfinityiDP系统不仅将从酶切到肽段分析的一系列过程在线自动化,通过在检测部分追加LC/MS,还可实现直到质谱分析的一系列流程的自动化。与以往的手动处理相比,可以统一控制酶反应、浓缩・脱盐等处理,降低了人为误差,提高了分析精度。另外,采用在抑制交叉污染方面获得用户高度肯定的HPLC硬件以及对分析方法进行最优化,实现了极低的交叉污染,包括将LC/MS作为检测器使用的场合在内,提供了高可靠性的数据获取环境。