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检测实验室揭开H7N9神秘面纱 病毒8小时现出原形

   2024-11-23 现代实验室装备网637
  摘要:为H7N9禽流感病毒验明正身的检测试剂相继抵达我国各地实验室,群众对神秘的病毒试剂关注度持续上升。昨日,在太原市相关部门的特许下有记者穿上防护服进入疾控中心PCR核酸检测实验室近距离探访H7N9禽流感干病毒的检测过程。

  太原市疾病预防控制中心的PCR核酸检测实验室设置在中心4楼。在进入实验室前,工作人员需先在更衣室穿上防护衣,戴上口罩、帽子和手套。经过严格的防护消毒流程后,记者跟随工作人员进入实验室的“玻璃屋”。实验室分为四个独立的区域,分别是:试剂准备区、标本制作区、扩增区和产物分析区。在试剂准备区,记者看到,工作人员根据不同试剂的属性,将检测试剂盒分别冷藏在2-8摄氏度以及零下20摄氏度的专用冰柜中。通常情况下,检测试剂在这个区域内“整装待发”,并“组装完成”。在这个区域配制成功后的试剂,将被通过特殊传送窗口,进入到隔壁的“标本制作区”。

  标本制作区是整个实验室的核心部位,通常情况下,工作人员要在这里将流感病毒的核酸提取出来。核酸是病毒基因,核酸提取在H7N9禽流感病毒的检测中是最关键一步。工作人员高丽介绍:在平日的检测过程中,检测员会在离心瓶中放入检测试剂,经过震荡、离心等一系列复杂的程序,病毒的核酸便被分离出来。最后,样本被加入到外形像个小型洗衣机的“荧光定量PCR仪器”中。在扩增区,随着仪器的运转,病毒基因被扩增到了几百万个不等,经过3-5个小时后,检测结果将会显示在电脑屏幕上,检测人员就可以根据曲线图判断是否为H7N9病毒。

  值得一提的是,为了保证环境清洁,实验室使用单向通道,“只能前进,不能倒退”。当记者提出想返回先前的区域时,工作人员表示,必须先从出口门出去,再从入口重新进来。记者看到,每个实验区域都设置了单独的洗手台和清洁池。工作人员每进入下一级区域,将被要求换上不同颜色的防护服。根据防护级别不同,防护衣分为粉色、绿色和蓝色。“检测H7N9病毒,从试剂准备到出结果,一般需要8个小时左右。”高丽参与了前3例的疑似病例排查。她说,为减少实验过程中的污染,保证结果精准,整个检测过程中,实验人员被要求全程呆在实验室。H7N9禽流感病毒检测需要重复检测两次,如果结果相同,再送到省疾控中心实验室检测一次,如果结果呈阳性,将被送到中国疾控中心实验室复核。

  负压隔离病房:带菌空气特殊处理后排放

  作为我省首批唯一一所人感染H7N9禽流感的省市两级定点救治医院,太原市第四人民医院的重症医学科已按照相关要求:备好32张救治病床,并做好了一切救治准备。4月15日,本报记者被特许进入该院的负压隔离病房进行探访。

  重症医学科被分为清洁区、潜在污染区、缓冲间和隔离病房等区域。在进入隔离病房之前,记者被要求不能随意进出,因为随着开关门次数的增多,病房内的压力会即时发生改变,进而影响到室内空气质量。在负压病房外,医院专门设立了缓冲间,“医务人员在缓冲间要换好N95口罩、穿戴好鞋帽、护目镜、白色连体防护衣后才进入。”重症医学科护士长张霞说。

  负压病房是世卫组织在规定抢救SARS病人时特别强调的一个重要条件,只有设置负压病房的医院,才可以救治有严重呼吸系统传染病的病人。

  这里一间负压隔离病房面积约为18平方米。按照救治重症病人的标准,医院已在房间内配备了有创呼吸机、无创呼吸机、输液泵、注射泵、吸氧装置等装置,“确保重症病人一来,医护人员马上投入抢救。”医院相关负责人介绍:“负压病房”意味着病房的压力最低。在病房开门的瞬间,新鲜空气会被“压”进病房,而病房内的空气却不会“溜出去”。这既保证了给病人输送新鲜的空气,又能防止病房内的污染气体向外倒流。记者发现,隔离病房的送风口在病床的上方,出风口在病床一侧的墙壁下方。张霞介绍,之所以这样设计,是为了让病人躺在病床上时,“头部送来新风,而呼出的气体通过负压,从侧面的管道里抽送出去,经过特殊处理后排放。”

  除了大量的抢救设备以及负压设计外,记者在隔离病房内发现了一个1平方米大小的传递窗。张霞介绍:病人救治期间,食物、药品等物品会通过传递窗消毒后送入病床前,这样可以避免医护人员由于传送物品而频繁进出病房所带来的污染。病房两侧的走廊是双通道设计:工作人员和医务人员一个通道,病人走另外一个通道。病房床头的方桌上,摆放着手部消毒液。张霞说,在对病人进行救治的过程中,医护人员被要求随时用消毒液对手部进行消毒。

  隔离病房内设置有单独的卫生间。据介绍,卫生间的局部压力要比病房低一些,“因为那里有病人的分泌物和排泄物,压力低的目的在于:避免污浊的空气和病菌外流。”记者在卫生间看到,医院专为病人配备了单独的洗漱池和便池,方便病人使用。

  检测相关程序 让病毒现出原形

  步骤一:提取样本

  一旦发现可疑病例,遍布全省各市的哨点医院将提取患者的鼻咽拭子或是呼吸道样本,送往省内15家具有试剂及确诊能力的网络实验室。

  步骤二:标本处理

  送达的标本将首先拿到生物安全柜内进行处理,防止标本被外环境污染和实验人员被感染。

  工作人员将粘有咽部上皮细胞的棉签充分挤压,这样细胞才能释放出来融入液体内。

  步骤三:提取核酸

  融入细胞的的液体将由工作人员送到一台名为“核酸提取工作站”的仪器内提取病毒的核酸(DNA)。

  仪器采取磁珠法提取,经过裂解处理,磁珠吸附核酸,再将磁珠上的核酸洗出,完成核酸从细胞中提取。

  步骤四:确定病毒

  核酸提取后,对病毒进行PCR检测。此前,将进行PCR体系配置:向样本中添加反应剂,让病毒“现身”。针对H7N9病毒检测,国家下发的有9种反应剂。如有病毒成分,起反应时将被仪器感知。

  体系配置完毕后,与已提取出的核酸融合,通过荧光定量机检测,确定是否为流感,确定是哪类流感。

 

 
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