Orbitrap Fusion LC-MS系统
赛默飞色谱质谱首席技术官Ian Jardine 博士说,“我们的使命是要创造有史以来最高性能的商业质谱仪。此外,我们想使这种有力的工具广泛应用到科学界,使它非常容易使用。Orbitrap Fusion LC-MS实现了在一个灵活的研究质谱系统中融合了四极杆、线性离子阱和Orbitrap技术,最终产生了一种全新的质谱仪器类别,而这款仪器将改变我们客户的科学研究。”
“我们最大的挑战灵敏度和通量”,哈佛医学院细胞生物学教授史Steven Gygi博士解释说。“Orbitrap Fusion LC-MS是革命性的,它使我们能够实现更大的蛋白质组全覆盖,而且比以往定量更准确。”
Orbitrap Fusion LC-MS系统解决通量挑战的方法之一是通过串联质谱标记(TMT)。这项技术使质谱仪同时可以确定多个样品中蛋白质的相对量。相比以前的仪器,Orbitrap Fusion LC-MS大大提高了数据的深度和质量,使TMT结果远好于先前。新平台利用的三级质谱(MS3)的选择性,提高定量的准确性。赛默飞还推出新的TMT试剂,可以实现全面,同时分析多达10个样品。
Orbitrap Fusion LC-MS的核心是一种三个不同质量分析器结构,它们一起工作可以提高分析性能提高到新的水平,并使全新的实验方法成为可能:
(1)四极杆作为预选择,隔离宽度为0.4amu,达到极好的灵敏度和选择性;
(2)超高场轨道阱提供超过45??0000的分辨率,以及高达15赫兹的扫描速率,提供无与伦比的选择性和分析速度;
(3)多级离子通络随后跟随双压线性离子阱,其提供MSn HCD、CID和ETD的碎裂,并进行快速(扫描率高达20赫兹),灵敏的质谱分析与。同步的前级选择提高了仪器的信噪比。
这“Tribrid”结构使用户能够确定大量更低丰度蛋白,速度比可能获得的现有商业化仪器更快。它独特的架构实现在Orbitrap和LIT中同时实现预隔离、碎裂和数据采集。与现有仪器相比,它可以收集更多高质量的数据,可能扩展实验范围。
在MSn分析中的任何阶段都可以选择碎片模式,通过 Orbitrap或LIT进行检测,使得从代谢产物、多聚糖、翻译后修饰和序列多态性中获得新水平的结构信息。
在典型的代谢组学实验中,随着目标化合物的变化,科学家们经常遇到的未知物。为了确定未知物,必须将样品上LC-LIT上重新分析以获得MSn数据。但在第二次分析,它很难确保保留时间吻合,因此引入很大的不确定性。然而,凭借其独特三种质量分析器结构,新的Orbitrap Fusion LC-MS解决了这个问题,用户能将许多小分析实验转换,并最终确定未知物。
Orbitrap Fusion LC-MS软件可提供动态扫描管理(DSM)的功能,当实验运行时,其可自动调整扫描参数,以达到最佳的效果。
Orbitrap Fusion LC-MS还提供一种新型的,易于使用的拖放方法编辑器,其可以从设置的复杂方法中去除大部分的猜测。这是只一套全面支持该系统大的软件平台功能的一部分。它还包括:
(1)Freestyle软件,一种新的数据可视化工具,也有利于快速的方法开发和数据质量评估。
(2)Proteome Discoverer,一个全面的应用软件,用于蛋白质鉴定。
(3)Compound Discoverer软件,广泛的应用于小分子结构鉴定。
(4)SIEVE软件,用于蛋白质组学和小分子样品的定量分析。
(5)mzCloud软件,一种新型的质谱数据库,支持未知数鉴定和结构鉴定。