沃特世公司(简称沃特世)近日推出了新型的 Waters® ACQUITY UPLC® M-Class系统 ,这是业内首台涵盖纳升级至微升级的UltraPerformance LC® (UPLC®)超高效液相色谱系统,系统耐压高达15,000 psi。将此系统与沃特世质谱仪联用,能够对复杂样品体系中含量极低的分子进行鉴定和定量,提供前所未有的高灵敏度。ACQUITY UPLC M-Class系统可用于蛋白质组学、代谢分析、代谢物鉴定和药代动力学研究等各个领域。同时,全新设计的可耐受15,000 psi压力的亚2 μm色谱柱,提供更快的分离速度、更高的峰容量和灵敏度。
ACQUITY UPLC M-Class系统在 WCBP 2014研讨会 上首次亮相,这是一个以生物技术药物分析方法为主题的学术会议。新系统将于今年第一季度开始发货。
ACQUITY UPLC M-Class系统
“进行蛋白质组学研究和生物技术药物研发的科学家们向我们反馈,说他们经常会遇到非常有挑战的研究课题:样品组成非常复杂,性质相近的干扰物含量远远高于目标蛋白分子,要对这些极微量的关键蛋白质分子进行鉴定和定量;也需要获得高覆盖率的蛋白质鉴定结果。如果没有合适的分析工具,这将会是一个非常棘手的问题。现在,有了ACQUITY UPLC M-Class系统,科学家们就能够探索未知领域,实现研究目标。”沃特世公司总裁Art Caputo说,“作为质谱仪的LC接入口,这套系统能让更多的科学家轻松采用微升级色谱解决最为复杂的分析难题。”
纳升级至微升级LC是指介于200 nL/min至100 μL/min的流速范围,使用小于1.0 mm内径色谱柱的LC系统,其优点包括节省样品和溶剂、更高的分析灵敏度以及更好的电喷雾离子化质谱(ESI MS)分析灵敏度。
ACQUITY UPLC M-Class系统的主要创新在于更低的系统体积和全新设计的流路,保证在色谱分离过程中最大程度地降低扩散和由于吸附而造成的样品损失。系统内部流路全部使用惰性材料,可保证样品稳定不被改变,并最大程度提高目标生物分子的回收率。为保持峰容量,该系统配备了专为微升级分离而优化设计的新型微升级ESI质谱喷针,以及低扩散的光学检测流通池,以保持光学检测的高分离度和灵敏度。凭借更高的系统耐压,您可以使用更长的亚2 μm颗粒色谱柱(长达250mm),达到更快的分析速度和更高的分离度。
随着ACQUITY UPLC M-Class系统的推出,沃特世还同时推出了五款内径从75 μm至1.0 mm的新型色谱柱,分别为:HSS T3(1.8 μm,孔径100)、BEH C18(1.7 μm,孔径130和300)、BEH C4(1.7 μm,孔径300)、CSH C18(1.7 μm,孔径130)和Symmetry® C18(5 μm,孔径
100)。并且,沃特世还推出了全新的亚2 μm颗粒300 μm内径不锈钢色谱柱系列。
利用HDX技术监测蛋白质高级结构
氢氘交换质谱(HDX-MS) 用于研究蛋白质的结构动力学和构型变化,可更好地确定它们的高级结构。氘是氢的一种重同位素,因此可以通过质谱对氘含量进行测量或“称重”。
科学家们使用HDX-MS研究获得的信息对不同“状态”的蛋白质高级结构进行对比,如对比与候选药物结合前和与结合后的构型变化,定位药物结合部位和结合的强弱。通过计算和比较氘交换水平的差别来获得蛋白质构型变化的信息。HDX-MS能够在溶液中监测蛋白结合域相互作用情况、蛋白质结合动力学、配体结合以及蛋白质折叠等相关研究。
HDX-MS研究需要对蛋白质构型的微小变化进行检测,高效率的色谱分离对达到高品质的数据结果至关重要。ACQUITY UPLC M-Class系统更高的耐压确保了能够在0℃对酶切肽段快速进行LC分离和质谱检测。全自动HDX-MS系统整合了HDX-MS的所有步骤,包括全自动的氢氘交换样品制备过程、蛋白质序列确定、氘交换曲线以及沃特世独有的DyanmXTM HDX数据分析软件。
同时发布的还有沃特世专门开发的用于用于蛋白质“在线酶切”的UPLC色谱柱,即Waters EnzymateTM BEH在线Pepsin酶切柱,将HDX-MS效果提升到一个新高度。ACQUITY UPLC M-Class系统与Waters SYNAPT® G2-Si或Xevo® G2-S QTof质谱仪联用,提供高质量的图谱和数据,得到HDX-MS分析所需要的微小质量变化。将所有这些创新技术组合在一起,沃特世提供了完整的且独一无二的HDX-MS分析平台。
利用二维分离扩展分析动态范围
对于复杂样品,特别是当样品中的目标组分如蛋白质、肽或小分子的动态范围很宽时,二维LC是非常有用的策略。利用此技术能够增加色谱峰容量,具体的操作是先通过第一维分离对蛋白或肽进行分组,所得到的每一个馏分经过富集,再通过具有不同选择性的第二维色谱柱进行分离。
ACQUITY UPLC M-Class系统采用直观易用的向导菜单进行方法设置、标准化的色谱柱以及具有高重现性的色谱仪器有效简化了2D-LC分离。智能化阀操作增加了样品通量,同时最大程度地提高数据质量。