实验方法:学做实验两者方法有所不同,大概分为两种方法:向别人学习和自学。下面分别介绍一下吧
基本操作和基础知识
在开始学做实验的时候,最好有人指导。做实验的内容,大概分为基本操作和具体实验的操作。基本操作是具体实验的基础,例如:怎样量取容积,怎样测量和调节PH值,怎样清洗实验室器皿,无菌操作技术,怎样使用pipette,怎样配置溶液,怎样autoclave(高压蒸汽灭菌)等。学做实验的时候,应该先学最基本的操作,再学具体的实验。这些基本操作具有至关重要的作用,它直接决定了实验的成功率。
可以推荐几本基本关于实验操作的书。第一本书是《分子生物学实验室工作手册》(英文名At the bench: a laboratory navigator)。这本书是生物医学研究生的入门书籍,建议精读三遍以上。本书中译本大约300多页,相对于将要介绍的其它几本书籍要薄很多。它介绍了怎样在实验室与他人相处,怎样建立实验室,怎样写实验记录,实验室的基本操作如试剂的配置、储藏和处理,无菌技术,细胞培养,离心,测PH值,电泳,显微镜的使用等。总而言之,本书基本上囊括了生物医学实验室日常遇到的问题和所有的基本操作,是生物医学研究生首选的入门书籍。
第二本书是《分子克隆》(英文名Molecular cloning: a laboratory manual),本书被誉为分子生物学的圣经,几乎每一个生物实验室都有一本。本书介绍了分子生物学常用实验技术的基本原理和许多protocol。目前已经出版到第三版。第一版出版于 1982年,第二版出版于1989年,第三版出版于2001年。书中提供的protocol很经典,但是有些目前已经改进了。这本书很厚,第三版英文版有2000多页,所以几乎不可能也没有必要精读所有章节,只要阅读自己正在做的实验的相关内容就可以了。
《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》这本书从怎样量取体积,称取重量,测量PH值,测量浓度等最基本的操作说起,讲到配置溶液,细胞培养,PCR,样本的准备,层析,电泳,印迹实验,显微镜,酶促反应(PCR等)。这本书共有737页,讲的是每天做实验都要遇到的问题,详尽系统却又简明易懂。对于希望学好做实验的人而言,本书必须仔细阅读,对于希望成为实验高手的人而言,本书更应该精读。Current Protocol是Wiley出版社出版的一个实验室手册丛书,是生物医学实验经典丛书之一,目前有16本,包括:Neuroscience, Molecular biology, Microbiology, Immunology, Toxicology, Cell biology等。
以上三本书各有特点。《At the bench: a laboratory navigator》为科普性质,是对实验室基础技术的粗略介绍,《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》是对实验室基础技术的详细介绍,而《Molecular Cloning》则是对具体实验的详细介绍。按照“柿子先捡软的捏”的原则,建议先通读《At the bench: a laboratory navigator》,再通读《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》1,2,3,5,9章及正在学习的具体实验的相关章节,加上阅读《Molecular Cloning》正在学习的具体实验的相关章节。通读的时候,标出重点及自己的知识盲点,以后多复习重点和知识盲点几遍直至了然于胸。
怎样向别人学做实验
如果有人教做实验,学习效率会高很多。无论是向老师还是向师兄师姐学习,都需要注意别人的时间是宝贵的,所以尽可能一两次学会。因此,在学习之前,先问清楚需要学习的实验内容,自己先通过阅读书籍,查阅网络资料对该实验的原理和基本操作有一个大概的了解。好记性不如烂笔头,在学习的时候,要带上纸笔做记录。遇到不懂的地方,不要因为觉得不礼貌而将疑问存于心中,而应该询问清楚。实验的精髓不是一份简单的Protocol,而是实验的“心法”:关键步骤,注意事项,常见问题和解决方法。做任何一个实验,必须清楚关键步骤、注意事项、常见问题和解决方法。要清楚一个试剂的作用是什么,加多或者少加会有什么后果;一个步骤的目的是什么,时间太长或者太短会怎样等。在学习的时候,如果没有教这些“心法”,自己应该主动请教,并记录下来。
一开始学做实验的时候,最好分三步走:老师示范,自己做老师看,自己独立做。认真的态度常常使别人乐于教你,如果自己无所谓,则别人会觉得教你是在浪费时间。在开始学做一个实验的时候,及时、详细的实验记录是非常必要的,如果实验失败,这些记录是分析失败原因的重要依据。做完实验之后,要总结经验教训,记录下来,并定期复习这些经验教训。总之,学做实验,遵循的步骤是:1。 预习。2。观摩,记录。3。自己操作。4。总结和复习。第一次实验就成功,常常不是一件好事,因为可能仅仅是运气好。多次失败后的成功才是掌握了实验的可靠指标。好的实验室常常有成熟的Protocol,不好的实验室,Protocol可能并不完善,需要自己摸索和调整。
怎样自学做实验
不是每一个实验都有人教,需要自学的情况很常见。自学做实验,必须在掌握了实验的基本操作的基础上进行。自学实验,关键是要找到可行的protocol,并清楚实验原理,关键步骤,常见问题和解决方法。 我一般采取的程序是:首先用搜索引擎检索实验原理,常见问题,注意事项等。把网上许多文章拷贝下来,仔细阅读,找出重点,总结成简化版。然后,找一个好的protocol。Protocol可以从检索,从书籍中找到,从别人的文献中找,或者从生物公司的网站上找。这些方法下面分别介绍。最好找到不同的protocol进行比较,分析为什么不同。通过比较,可以加深对实验的理解。
如果系里或者认识的人有正在学习的实验的专家,最好向专家请教,可以节约不少时间。有时候,一个小小的细节问题就可以浪费许多时间。