高速大容量冷冻离心机垂直转子的特点:
1、分离时间短。这是由于垂直转子样品区带移动的径向距离短,可以获得最小的K值。
2、受管壁效应的影响最小。
3、能够离心较大体积的样品。
4、分辨率高。由于离心过程中样品区带是沿离心管的长度铺开,转子降速过程中梯度重新定向,使区带间距增大。
5、提供最大的离心力。离心管所插的位置靠近转子的外边缘,其最小相对离心力比相同直径的水平转子和角转子都大。
6、梯度容量大。垂直转子梯度的横截面积大,在梯度上铺放大量样品是可行的。
(1)梯度介质应该是惰性的,至少对被分离颗粒没有毒性。
(2)梯度介质要能够把悬浮液中的颗粒定量的分离出来,即要求用它所配置的梯度柱要有确定的密度范围。
(3)应知道梯度介质的理化特性,能够利用这些特性中的一种或多种特性(如折射率)精确测定梯度介质的浓度。
(4)在给定的密度范围内,梯度介质对渗透压敏感的颗粒应该是等渗的。
(5) 在给定的密度范围内,梯度介质的粘度应尽可能低。
(6) 梯度介质应能调到与被分离颗粒生理状态一致的PH值和离子强度,并且不管介质浓度如何变化,PH值和离子强度都保持不变,也不会发生水合作用。
(7)梯度介质不会干扰分级分离时样品区带的监测。
(8)梯度介质应该很方便的从分离的颗粒中除去,并且不损失样品的活性。
(9)能够消毒,并且分离特性不变,不腐蚀所用的离心管、转子和各种量器。
(10)所用的梯度材料应该是纯的物质,价格便宜,贵重材料使用后便于回收再利用。
上述特点是对理想梯度介质的严格要求,没有一种材料能够全部满足这些标准。在速率区带分离中,蔗糖能够满足大多数颗粒分离的要求,是一种相对理想的介质。然而在等密度区带分离中,没有一种介质能够满足所有类型生物样品的分离,因此,分离不同类型生物样品要使用大范围的梯度介质。