实验的失误常常是“低级错误”,说出来不值一哂,可就是会发生在我们这些博士硕士“高级知识分子”身上,尤其是生手,大家都来晒一晒,都发生过什么低级错误,也让后来者借鉴,让旁观者一笑。
1、前半年提了数百例的DNA,当时条件差,完全靠自己摸索,DNA跑了、丢了都遇到过,还有一次,最后发现辛辛苦苦提出的DNA里居然不知什么时候钻进了一只蚊子,忍痛弃之。
2、记得第一次配电泳缓冲液TBE,看《分子克隆》上写的加入tris,硼酸以及EDTA,加水定容至100ml,在将这个配方抄写到实验记录本时压根就没注意是100ml直接就写成了1000ml(以前配溶液一般是配1000ml的,所以养成习惯了)。结果跑电泳的时候发现电流好低,一时之间不知道哪出问题了。后来翻记录和书上一对,发现少了个0,只好重配。
3、刚开始提人血液中基因组DNA标本,每次都很顺利,提过多次后,70%的乙醇用完了,就新配了一瓶。结果DNA总是在最后一步洗涤的时候消失,原来把70%的乙醇配成70%的水了。忙了半天全部重新做。
4、我有一次和几个同学抢PCR仪用,结果太着急了。东西没放进机器就开始P了。等我n个循环过后,我同学发现了。他们都笑话我,说我大唱:空城计。成了实验室的经典笑话了。
5、设置pcr程序的时候,总是不小心把30s设成30min,也不看运行时间就闪,然后一个半小时左右的时候准备取出,才发现还要运行n个小时~~
6、第一次收集蛋白样品,忘了放-80冰箱了,在室温放了几天.后来又放回去了!
7、换新的电泳槽时,没看好正负极,把胶板放错位置了 ,东西都跑到电泳液里了,重头再来!
8、先说说别人的, 再说说自己的
1)细胞培养实验, 我中午安排个师妹去准备下复苏细胞, 没想到晚上她就告诉我复苏好了, 我就奇怪了, 血清4度化冻怎么这么快? 原来她直接把血清从-20度丢到37度的水里化冻的, 结果复苏的细胞一瓶也没活。。。
2)师弟第一次用INVITROGEN的预制胶,他告诉我说电流上不去, 我去看了下, 要他把电压加大, 结果两边就冒火花!吓死人了, 于是我把电泳拆开, 发现预制胶的下槽的封口胶他没撕, 等于是绝缘的。。。自然电流上不去了
3)最后一个是我自己的, 在洗2D-GEL玻璃的时候给准备做毕业论文的本科生讲解, 然后我说, 洗玻璃的时候要特别注意哦! 一不小心就容易打烂, 几百块一块呢, 结果说着不小心玻璃在水龙头上一碰, 掉池子里砸碎了。。。当时那个安静啊, 那些本科生都看着我, 一脸的同情。。。(从此以后把实验室的水池全部铺上了橡胶皮,防止打烂东西。。。。)
9、自已将酶切好的PCR底物电泳,电泳仪打开了,然后忙其它的事去了,N小时后跑回来,发现电泳时间太长,带条跑“过”了。后来就把一个小闹钟带在身上。做实验看来就是专心啊,我是属于忘事佬一族的。
10、一次灌胶把胶从微波炉里拿出来后就放那和一个同学聊起天来了,结果想起来的时候胶已经在锥形瓶里凝固的很结实了。
一次做PCR忘了盖PCR仪的盖子了,结果啥都没跑出来。
再说一个别人的
我配的50XTAET被人当无水乙醇用了……
11、有一年我用SD大鼠做实验,应该雌雄配对,分开饲养灌胃用药,结果实验员疏忽,把一只雌鼠放到雄鼠笼子里,结果可想而知,一段时间后发现雌鼠体重迅速增加,体形改变,才真相大白,可惜浪费了许多时间!后来每次做实验,在分鼠时,我们都注意了!
12、我也来说说:
1)最郁闷的一次是导师出国前亲自教我提取RNA,结果离心后一点沉淀也没有,仔细分析原因,发现我把离心机12000rpm设成了1200rpm,导师一上午的时间就被我白白浪费了,当时那个无地自容啊,但是偶导师还宽慰我,说不犯错误也不好,这样以后就得注意了
2)偶师兄初次接触细胞培养,无菌操作时仔细的将手套,镊子用酒精全部擦了一遍,一个死角都没留,擦完之后觉得时候觉得湿湿的,就往酒精灯上考镊子,结果可想而知,镊子,手套成了火龙啊,还好还好没受伤
13、晒晒俺们实验室同志们犯的“低级错误”
1)纯水仪里加工业酒精(酒精和蒸馏水闻闻味道也能区分开!)
2)急着去吃饭,忘了灭超净台里的酒精灯,酒精灯烧干了,被老板骂了一顿!
3)做PCR时引物1加了两次,引物2没加;
4)加不同的液体不换枪头,造成交叉污染;
5)小鼠麻醉时加20ul麻醉剂,结果注入了200ul,可怜的鼠鼠当场眼睛就发白了!
6)冻存的细胞一直在4度放着!
14、做WESTERN犯了好多低级错误,回想起来有:
1)跑电泳时,正负极接反,溴芬兰跑出去了
2)点样时居然把DNA的MARKER当蛋白MARKER点了上去,跑了很久才发 现MARKER还是没有分开,....
3)转膜时切胶,切歪,把蛋白切掉了,555555
对策:
1)每次跑电泳,转膜都看清电极后接电源
2)每次点样都看清楚再点
3)转膜时切胶尽量切大些,宁愿多做一次,浪费点膜,也不要将胶切成很多小块,一次做多种抗体
15、提基因组弄了一下午,最后收集的时候编号错了,全白费了!!!
16、我的低级失误就更夸张了!!
PCR,试剂没有问题,问题在我放进机器之后居然没有盖盖子,都不知道当时哪根筋出了问题,知道后来有人在实验室大喊:。。。。。。
17、说说我的糗事吧,刚开始做实验,不是很懂,看过师兄做过一次PCR,跑过一次电泳,然后自己做,师兄在旁知道,加完样,跑完PCR,很顺利,正准备跑电泳的时候,师兄手机响了,是老板急召,他问我会不会跑电泳,我因看过一次,自己很有信心的说会,师兄于是放心的走了,结果30分钟后师兄回来了,我问师兄怎么除了marker有条带,PCR样都没条带,是不是PCR不好阿,师兄想不对阿,昨天他还能做出来的,今天怎么就做不出来了,于是就问我电泳怎么跑的,我就指了指一旁的Buffer,就是把PCR产物和Buffer混匀了加到电泳槽里跑个30分钟,师兄一看晕倒,我加的是跑PCR用的Buffer,而不是跑电泳用的loading Buffer,难怪跑不出来!刚开始做实验,迫切的想上手,但是似懂非懂,做错不少事情
18、用试剂盒抽提质粒,前面都需要离心,弃液,离心,弃液,最后一步ellotion buffer溶DNA,离心后,俺把收集的质粒继续弃去,然后……
19、我做免疫组化的时候,在多次洗脱后,加抗体之前不是要把组织玻片背面的水用卫生纸擦干嘛,同学催着我下班吃饭,一急一大意就擦反了,狂晕,我宝贵的组织啊,擦得剩下一丁点了。纠结啊,郁闷啊,不得已,切片来源很珍贵,也勉强做完了,幸好还能看见宝贵的阳性表达
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