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随着国内分子诊断行业的发展，涌现了一批在国内甚至国际上都比较有特色的检测技术，在这里简单概述几个技术。
（一）国内比较有特色的技术
一步法PCR检测技术
“一步法PCR检测技术”是国内一项具有自主知识产权的在国际上也是独有的技术，利用快速核酸释放技术，省去了加热、离心、移液、换管等操作，样本处理时间比同类产品大大缩短。样本处理与PCR扩增在一个PCR反应管中即可完成，只需微量样本即可实现高灵敏度检测，不但检测成本低，大大降低了对操作人员的要求，易于分子诊断的应用普及，利于自动化大批量样本处理，适合大型疾病如HBV、HPV筛查等应用。同时一步法技术可以给分子诊断的即时检测平台（POCT）提供最简洁快速的核酸检测方案，极大的简化检测装置和流程，确保分子诊断即时检测平台的移动性和时效性，在家用检测、危急病人实时检测、重大疫情的防控有着独特优势。
带磁珠扩增的磁珠法PCR检测技术
对比于传统的煮沸法，柱提法等核酸提取技术，国内自主开发的国际领先的第五代磁珠法核酸提取技术，通过超顺纳米磁珠富集样本中的核酸分子，在常温下裂解病原体，无需加热煮沸、离心，磁珠不需洗脱核酸，可带磁珠进行PCR扩增，简化操作步骤，灵敏度高、线性范围宽、可重复性好、抗干扰能力强，可实现自动化的PCR定量检测。在乙肝检测方面，灵敏度可达到国际领先的5-10 IU/mL，满足临床对病毒性肝炎感染进行早期诊断、病毒学应答、耐药监测、疗效观察及预后评估的需求。
集成自动化及微流控技术
体外诊断的自动化目前主要技术为机械手臂和微流控技术两类。这两类仪器各有特色和优势，活跃在不同的应用场景。基于微流控技术的体外诊断仪器往往全自动化集成，操作也比较简易。但是，相对机械手臂式的仪器而言，单个样品检测成本可能会较高。国内开发了集成全自动化机械臂和微流控芯片技术用于分子诊断的产品，利用机械臂的精准移液操作，并结合微流控技术制备的检测芯片，可以实现全自动化的核酸提取、扩增、杂交检测全过程，实现sample-to-answer的检测模式，同时可实现样本的多重检测。基于该模式，可以完成对病原体多型别的检测，比如HPV分型检测。
Super-ARMs PCR技术
突变扩增阻滞系统（amplification refractory mutation system，ARMS）是目前国际上肿瘤个体化分子检测最重要、最广泛应用的技术之一，其在临床应用中的优势已被业内专家广泛认可。厦门艾德自主研发的“Super-ARMS”是ARMS技术的升级版，保留了ARMS技术简便、快速、特异性好、易普及等特点，同时进一步提高检测灵敏度（灵敏度可达0.2%），用于临床检测晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者血液ctDNA中EGFR基因突变状态，筛选适合接受一代至三代EGFR靶向药物治疗的患者。
(二) 自动化核酸提取技术
核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器，目标用户通常为对标准化、质量改进和对自动化感兴趣的分子诊断和研究实验室，涉及核酸提取实验的小型、中型和大型实验室。最早将全自动核酸提取仪投入到市场的是罗氏公司，近几年来，开发核酸提取仪器的厂家如雨后春笋，国内的厂家主要有达安、圣湘、天隆、之江、安普利，国外的厂家有罗氏、雅培、凯杰、珀金埃尔默等。2017年市面上的各种核酸提取仪器得到了非常大的应用和推广。
按照核酸提取仪的功能大小，核酸提取仪分为两类：一类是大型的全自动化的核酸提取仪，一般称为自动液体工作站，样本试剂全部加在仪器上自动化处理；另一类是小型自动核酸提取仪，也称半自动核酸提取仪，利用封装好的配套试剂，手动加入样本，然后放置在仪器中自动完成提取纯化过程。自动液体工作站是功能比较全面的设备，液体分液、吸液等自动完成，有的甚至可以整合扩增、检测等功能，做到了样本进结果出，一次提取的样本量非常大，一般提取的通量在96个到几百个标本不等。小型的自动化仪器是通过运行结构的特殊设计达到自动提取核酸的目的，仪器设备和运行成本低，操作简单方便，一次提取24-48个样本不等。目前临床检验医学检测样本类型主要有血清、血浆、分泌物、脱落细胞、咽拭子、肛拭子、尿液、粪便、痰液、全血、组织、石蜡切片等十多种，不同的分析系统和试剂的核酸提取操作方式不一致，导致临床操作繁琐，容易出现操作误差，影响临床报告的准确性。国内有厂家率先开发了一种统一提取试剂，在其自动液体工作站上可以同时提取多种样本类型，简化核酸提取的操作，为下游的应用揭开了广阔的前景。
(三) 数字PCR
20世纪末，Vogelstein 等提出数字PCR(digital PCR，dPCR)的概念，即通过将一个样本分成大量等份，然后分配到不同的独立反应，每个独立反应单元至少包含一个拷贝的目标分子(核酸模板)，在每个独立反应的中分别对目的模板分子进行PCR扩增，然后对各个反应单元的荧光信号进行统计学分析。
当前数字PCR主要采用微流控芯片或微滴化方法，将核酸溶液分散至芯片的微反应器或微滴反应单元中，每个反应的核酸模板数少于或者等于1个。经过PCR之后，含有核酸分子模板的反应就会产生荧光信号，没有模板的反应就没有荧光信号。根据相对比例和反应单元的体积，就可以推算出原始溶液的核酸浓度。目前数字PCR主要在癌症标志物稀有突变检测、致病微生物检测、基因表达分析以及拷贝数变异分析等科研领域有较广泛的应用，同时也可以与高通量测序无缝对接，验证测序结果。
2017年4月21日，国家食品药品监督局同意南京科维思公司的芯片式数字PCR分析系统进入新一批创新医疗器械特别审批申请项目名单（“绿色审批通道”）。该款产品有望率先获得国家食品药品监督管理局认证，成为国内首款基于数字PCR的临床级检测产品。
(四) 国内测序技术
2017年，国内厂家新推出了GenoCare、MGISEQ-200、MGISEQ-2000等几款国产测序仪。2017年1月，国家食品药品监督管理局批准了DA8600高通量基因测序仪适应范围变更，由原来的“仅用于胎儿染色体21三体、18三体、13三体的非整倍体检测”扩展为“用于胎儿染色体21三体、18三体、13三体的非整倍体检测，人体基因位点的检测”。2017年03月，国家食品药品监督管理局批准了基因测序仪NextSeq 550AR和胎儿染色体非整倍体（T21、T18、T13）检测试剂盒（可逆末端终止测序法）的医疗器械产品注册。2017年12月，BGISEQ-50基因测序仪获得国家医疗器械注册证。
2017年11月，北京大学黄岩谊教授团队开发了一项被称为ECC（Error-Correction Code）测序的新技术，发表在Nature Biotechnology上。该技术是基于信息理论来修正错误的高准确度荧光DNA测序方法，将使高通量测序仪的精准度进一步大幅提升。通过实验室样机的测试，测序读长可以达到250bp，其中前200个碱基的准确率可达100%。这一新型测序仪创造性地结合了“荧光发生”和“纠错编码”技术，测序结果将具有更精准、更高效、更经济的显著特点，将为国产高端医疗设备制造和市场应用带来新鲜血液。
2017年，国产BGISEQ-500平台的通用测序仪及其配套试剂、NIFTY检测试剂盒及核酸提取试剂盒均获得了欧盟医疗器械CE Mark认证。这意味着由中国智造的高通量测序仪及其产品满足了欧洲体外诊断器械相关指令的法规要求，有望获得更多推广。
(五) 微生态研究
按照正常微生物群所占的空间不同，人类微生态系统分为以下几类，即人类口腔微生态系统、胃肠道微生态系统、泌尿道微生态系统、生殖道微生态系统、皮肤微生态系统、呼吸道微生态系统。其中肠道微生态与疾病的相关性研究成为2017年的科研热点，已经报道了肠道细菌多样性与克罗恩病、糖尿病、心脑血管病、结直肠癌等疾病具有很高的相关性，例如在结直肠癌患者的肠道中能特异性的检出具核梭杆菌含量增高。同时也有研究报道显示肠道细菌菌群构成与癌症的用药治疗、化疗效果具有相关性，为癌症的个体化治疗提供一个新思路。不过目前肠道微生态的临床研究还处于科研阶段，仍然需要更多数据支撑来明确临床诊断的意义。
2017年6月20日，《Nature Medicine》刊文关于发现抑制肥胖的肠道微生物——多形拟杆菌。上海交通大学瑞金医院的宁光院士、王卫庆教授团队，以中国的汉族年轻人为研究对象,研究发现肥胖人群中谷氨酸的含量非常高，与苗条人群形成显著差异，并且在肥胖人群中谷氨酸的含量与多形拟杆菌的数量呈反比。通过对小鼠移植多形拟杆菌的动物实验，以及分析23名接受过袖状胃切除术的志愿者的肠道微生物得到进一步验证，从研究上预示着通过肠道微生物来治疗肥胖是可行的。
(六) 无创产前单基因病检测技术
随着高通量测序技术的发展及推广，无创产前基因检测技术（NIPT）在临床上得到了广泛的应用，为唐氏综合症等染色体变异的筛查提供了精准、便捷的解决方案。但NIPT技术仅筛查染色体层面的变异检测，而不涉及导致出生缺陷的另一大类因素---单基因遗传病，单基因病种类繁多，综合发病率高，对人类健康造成严重损伤（致死、致残或致畸），而且缺乏有效诊治手段，一旦发生会给社会以及家庭造成沉重的负担。
为解决无创产前单基因病检测方面的技术缺陷，香港中文大学卢煜明教授与美国新型测序公司10X Genomics联合，应用10X Genomics的linked Read技术对父母双方基因组单倍型分型，并对单基因病突变位点附近有效单核苷酸多态性（SNP）进行区分，之后通过对母亲外周血DNA进行测序，推断胎儿是否存在相关遗传突变。该技术可以对单基因病进行无创产前检测，可以用一种方法完成对多种单基因病的检测，是无创产前基因检测技术应用的一大突破。
(七) 感染病原体测序
感染性疾病的病原种类繁多，传统的血清学、培养等手段在鉴定感染性疾病的病原方面耗时费力，难以及时的给临床提供可靠的诊断依据，使得不少感染性病患者未能得到及时有效的治疗，导致预后不良。国内公司采用高通量宏基因组测序技术对病原体感染患者提供基因检测，通过微生物专业数据库比对和智能化算法分析，获得疑似致病微生物种属信息，可以为疑难危重感染患者提供快速精准诊断依据，促进抗生素合理使用。该检测可协助临床快速鉴定并明确患者的感染病原体，特别是对未知或者无法培养的病原有独特优势。对感染病原体进行定性定量的同时，实现病原体基因组变异的检测，研究病原体随时间的变异情况，有助于疫情起源追踪与疫情监测，可以发现新的病原体，是院内感染控制和社区感染暴发调查的有力手段。
市场现状
(一) 分子诊断发展迅猛，但上游技术创新有待加强
分子诊断行业上游包括检测仪器、诊断试剂、耗材等产品供应商，是以研发和技术创新为主要竞争力的产业领域。下游行业是为患者提供医疗服务的机构，包括医院、第三方医学检验服务机构、科研机构等，主要以医疗服务为主要产业支撑，受到上游产业的极大制约。
发展上游高端原创技术，不仅是分子诊断相关企业的核心竞争力，也是我国基因检测行业以及精准医疗发展的关键因素。目前国内基因检测市场虽一片繁荣，部分技术和产品已经赶超国际先进水平，但国外技术垄断现象还较为突出，真正拥有自主创新核心技术的民族企业较少，大多数机构仍处于下游的检测服务端，上游技术的创新及新技术平台的开发有待加强。
(二) 分子诊断国产化加速推进，测序仪国产化刚起步
伴随着分子诊断市场的逐渐扩大化、基因检测相关仪器设备大批量涌现，目前主要有核酸提取仪、PCR扩增仪、核酸分子杂交仪、基因芯片仪和基因测序仪等。在技术相对容易攻破的中端仪器领域，如核酸提取仪、PCR扩增仪、核酸分子杂交仪、基因芯片仪国产化已经成型，并逐渐占据主要市场，而基因测序仪国产化才刚刚起步，测序设备、耗材技术门槛较高，主流测序设备及技术基本掌握在少数几家欧美公司手中，Illumina和Thermo Fisher两家公司合计占据全球约90%的市场份额，已经形成寡头垄断格局。2017年作为国产测序仪创新的元年，华大基因、瀚海基因等企业都已推出自己的测序仪，随着掌握核心技术的企业出现，中国的高通量测序企业正在向自给自足的方向发展。
(三) 临床分子诊断项目不断增多，但仍然以感染性疾病检测为主
目前国内分子诊断应用主要以感染性疾病检测为主，如肝炎、性病、手足口、结核、流感、血液传染病等，主流技术为荧光PCR技术，是目前临床分子诊断技术应用最为成熟的领域；而遗传性疾病检测方面，目前应用项目在增多，但仍主要集中在无创产前筛查和遗传性癌症检测等少数项目；肿瘤个体化治疗和药物基因组检测方面，应用项目也在增多。
据不完全统计，2017年感染性疾病筛查市场来看，病毒性肝炎产品检测人份数占到感染性疾病检测占比达到49%，增长最快的是HPV检测市场，性传播类病原体检测及儿科感染性疾病、呼吸道病原体检测也将是未来临床市场的主要增长点（见图1）。
图1. 2017年全国感染性疾病检测市场分布情况
(四) 重大疾病防控，分子诊断市场进一步释放
2008年我国新发癌症数量为280万例，2015年达到429万例。我国近30%的新发癌症（宫颈癌、肝癌、鼻咽癌等）是由病毒等感染引起的，而欧美发达国家由于分子诊断技术广泛应用于临床和普筛，使这一比例已下降到4%。
以宫颈癌（通过分子诊断筛查完全可防可控的癌症）筛查为例，我国每年新发病例超过13万，占全球的近30%，国内HPV检测试剂获证产品虽超过70余个，但中国3.5亿的适龄人群采用基因筛查的覆盖率不到2%，而西方发达国家覆盖率为30%。因技术的便捷化和普及性优势，HPV检测将替代传统的细胞学方法成为宫颈癌筛查的主流技术。2015年国家食品药品监督管理局推出《人乳头瘤病毒（HPV）核酸检测及基因分型试剂技术审查指导原则》对国内HPV检测产品市场进行了严格规范，2017年还发布更新了我国首个《子宫颈癌综合防控指南》，明确强调推荐使用HPV检测作为宫颈癌初筛技术进行应用普及。我国有近3.5亿宫颈癌筛查适龄妇女，面对如此庞大的筛查人群，简便、快捷、准确显得尤为重要。
(五) 建设没有肝炎的未来
2017年2月第26届亚太肝病研究学会年会（APASL）上，世界卫生组织（WHO）提出，2030年要全面消灭病毒性肝炎，将新发慢性乙肝和丙肝减少90%，把乙肝和丙肝死亡率降至65%，实现慢性乙肝和丙肝治疗覆盖80%的患者。2017年11月，由国家卫生计生委、国家发展改革委等11个部门为贯彻落实全国卫生与健康大会精神和《“健康中国2030”规划纲要》部署，联合制定发布了制定《中国病毒性肝炎防治规划（2017-2020年）》，进一步加强我国病毒性肝炎防治工作，不断降低疫情流行水平，保障人民群众身体健康，明确了我国病毒性肝炎防控任务和规划。作为防控体系当中的重要组成部分，国内分子诊断企业正联合WHO、国家民政部（中联肝健康促进中心）共同推进消灭丙肝公益项目。自2013年高敏肝炎病毒定量检测项目列入国家临床检测目录以来，高敏肝炎病毒定量检测对慢性肝炎患者病毒载量监测、抗病毒治疗监控、耐药监控、治疗方案选择具有重大价值。国内厂家采用国际领先的超顺纳米磁珠核酸提取技术，开发出达到国际先进水平5-10 IU /mL的高敏乙肝病毒核酸定量检测试剂，促进我国乙型肝炎诊疗体系的技术创新，为我国推进消除病毒性肝炎危害，建设没有肝炎的未来做出贡献。
(六) 加强分子诊断在血液安全检测中的应用
在疾病传播过程中，经输血传播疾病是危及公共健康的重要环节之一。WHO统计全球每年有近百万人因输入不健康血液或血液制品感染艾滋病、病毒型肝炎等传染病。据卫计委统计，我国2016年无偿献血人次达到1400万,采血总量达到2360万单位。常规酶联免疫吸附法（ELISA法）由于窗口期长，容易出现病毒变异和静默感染漏检等问题，核酸检测（NAT）技术可以弥补ELISA法的不足。1997年，德国最早就开始采用NAT技术用于血液检测，随后欧美等发达国家也采用NAT技术。我国自2010年开始在12省的16个血液中心开展NAT试点，2013年卫计委发布《关于印发全面推进血站核酸检测工作实施方案（2013-2015年）通知（方案）》，强调到2015年实现核酸检测基本全国覆盖。到2016年底血液筛查核酸检测已覆盖全国血站。从原来常规2遍ELISA检测，到目前2遍ELISA检测加1遍核酸检测，确保血液安全。2017年11月，《中国病毒性肝炎防治规划（2017-2020年）》，再次提出确保血站血液乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒核酸检测率全覆盖，确保血液安全。
血液核酸检测厂家国际上主要是罗氏和盖立复，在国内主要也是罗氏和盖立复进口产品占据半壁江山，国内主要厂家有科华生物，达安基因，华益美和上海浩源。进口产品在系统稳定性，试剂灵敏度等方面优势明显，现在国产产品在试剂灵敏度方面开始赶超国际产品，如圣湘生物研发的第五代血筛产品，试剂灵敏度达到国际领先水平。
