别名:Alkaline Phosphatase Assay Kit摘要
碱性磷酸酶的活性检测试剂盒。常用于检测培养的成骨细胞、实验动物血清和骨组织中的碱性磷酸酶活性。
碱性磷酸酶(ALP)广泛分布于肝脏、骨、小肠之中。特别在骨代谢研究领域方面被用作为骨形成指标之一。本品是用p–硝基苯磷酸作为底物的碱性磷酸酶检测试剂盒,利用微孔板,可进行多种样品的检测。【检测原理】
样品在含有p-硝基苯磷酸的碳酸盐缓冲液(pH9.8)中反应,在样品中的碱性磷酸酶作用下,p-硝基苯磷酸分解为p-硝基酚和磷酸。生成的p-硝基酚为碱性,呈黄色。根据测量其405nm的吸光值,计算出样品中碱性磷酸酶的活性。■LabAssay TM ALP [p-硝基苯磷酸基质法]
【性能】
・检测范围:>0.06 mmol/L
・标准曲线范围:0~0.5 mmol/L
・再现性:C.V.<10%【试剂盒组成】
・底物---------------------20片(溶解时:p-硝基苯磷酸二钠 6.7mmol/L)
・底物溶解液-------100ml×1瓶(2.0mmol/L氯化镁含有0.1mol/L碳酸盐缓冲液pH9.8)
・反应终止液-------100ml×1瓶(0.2mol/L氢氧化钠溶液)
・标准液---------------10ml×1瓶(0.5mmol/L p-硝基酚溶液)【试剂的配制】
1)底物缓冲液:1片底物溶解于5mL底物溶解液中。
2)反应终止液:直接使用。
3)系列稀释标准液:将标准液用蒸馏水依次稀释为0.5、0.25、0.125、0.0625 mmol/L等2倍率稀释液系列。【标准操作法】
向96孔微孔板内添加100μl底物缓冲液和20μl样品,在微孔板震荡器上充分振荡1分钟后,37℃孵育15分钟。
添加80μl反应终止液,在微孔板震荡器上充分振荡1分钟后,用酶标仪测量405nm处的吸光值
。同样方法进行空白(蒸馏水)对照和标准品的检测。广州波柏贸易有限公司
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