多糖分离的方法
1 多糖的预处理
很多的食品样品中含较多的脂类物质,直接影响结果的测定,因此在提取之前要先除去脂溶性杂质,一般用石油醚等溶剂回流的方法,然后除去单糖、低聚糖及苷类等干扰性成分,一般用85%的乙醇。同时,对多糖进行预处理也可以除去天然
产物中的色素[6, 7]。
多糖的提取
化学方法提取
多糖分离不需要脱脂的原料和脱脂后的残渣可以用水作溶剂提取多糖。此外,使用碱性水溶液作提取溶剂可以提取含有糖醛酸的多糖。碱法提取多糖的收率较高、提取时间较短,但提取液中常含有蛋白质等其它杂质,粘度较大,过滤困难。含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖,可用乙酸或盐酸调节成酸性,然后再加乙醇,使其中的多糖沉淀析出;另外,也可通过加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而使多糖析出。需要注意,在酸性条件下多糖中糖苷健可能会断裂,且对容器造成腐蚀,所以一般只采用弱酸[8]。若用酸液或碱液提取的,提取后应立即中和。提取液有的可以直接过滤,有的因提取液较黏稠不易过滤,往往用离心法除去不溶物。提取所得的滤液或上清液浓缩,加2-5倍量的有机溶剂(常用的有机溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇及丙酮等),得粗多糖沉淀。